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镍柱与His标签的结合原理主要依赖于金属螯合作用，镍柱上的镍离子可以与固定在蛋白质上的组氨酸（His）进行结合，由于镍离子具有空轨道，可以与组氨酸的氮原子形成配位键，因此当蛋白质经过镍柱时，其上的His标签会与镍离子结合，从而实现蛋白质的固定和纯化，这种结合作用具有高度的特异性和亲和力，因此广泛应用于蛋白质纯化过程中，镍柱与His标签的结合就是通过镍离子与组氨酸之间的相互作用实现的。